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pSpCas9(BB)-2A-Puro (PX459) V2.0
pSpCas9(BB)-2A-Puro (PX459) V2.0 (商品货号: #JYY011172)
载体简介:Cas9 from S. pyogenes with 2A-Puro, and cloning backbone for sgRNA (V2.0)
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  • 质粒分享者:Feng Zhang
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载体信息

载体图谱

载体序列

相关资料

载体骨架信息

  • 质粒骨架名称: PX459
  • 质粒大小(bp):9200
  • 表达系统: 哺乳动物表达载体
  • 质粒的功能/用途: CRISPR 载体
  • 筛选标记: 嘌呤霉素(Puromycin)

原核培养信息

  • 菌株抗性: 氨苄青霉素(Ampicillin)
  • 质粒的拷贝数: 未知
  • 克隆菌株: stbl2,stbl3等能有效抑制错误重组的感受态细胞
  • 培养温度: 37°C

插入基因

  • 插入基因名称:hSpCas9-2A-Puro V2.0
  • 基因别名:SpCas9-2A-Puro V2.0 Cas9 PX459 V2.0
  • 插入基因/序列的物种来源: 人工合成(Synthetic)
  • 插入基因/序列的片段大小(bp): 6000
  • 融合蛋白/标签:
    • 3XFLAG (插入基因-N端)

插入基因克隆信息

  • 启动子: Cbh
  • 克隆方法: 限制性内切酶法
  • 5’端酶切位点: AgeI
  • 5’端酶切位点克隆过程中是否被破坏: 未被破坏
  • 3’端酶切位点: EcoRI
  • 3’端酶切位点克隆过程中是否被破坏: 未被破坏
  • 5’端测序引物: TTTATGGCGAGGCGGCGG
  • 3’端测序引物: puro-variant-R (5-gtgggcttgtactcggtcat-3)
如何引用此质粒
此质粒的知识产权归分享者所有,如果您在准备发表的学术出版物中利用到了此质粒,请您务必引用相关文献,并且在材料与方法部分向分享者致谢。
材料与方法部分:
pSpCas9(BB)-2A-Puro (PX459) V2.0(Jiyin Cloud #JYY011172) 由分享者Feng Zhang馈赠
参考文献部分:
Genome engineering using the CRISPR-Cas9 system. Ran FA, Hsu PD, Wright J, Agarwala V, Scott DA, Zhang F. Nat Protoc. 2013 Nov;8(11):2281-308. doi: 10.1038/nprot.2013.143. Epub 2013 Oct 24. 10.1038/nprot.2013.143PubMed ID24157548
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