载体骨架信息

• 质粒骨架名称： PX459
• 质粒大小(bp)：9200
• 表达系统： 哺乳动物表达载体
• 质粒的功能/用途： CRISPR 载体
• 筛选标记： 嘌呤霉素（Puromycin）

原核培养信息

• 菌株抗性： 氨苄青霉素（Ampicillin）
• 质粒的拷贝数： 未知
• 克隆菌株： stbl2，stbl3等能有效抑制错误重组的感受态细胞
• 培养温度： 37°C

插入基因

• 插入基因名称：hSpCas9-2A-Puro V2.0
• 基因别名：SpCas9-2A-Puro V2.0 Cas9 PX459 V2.0
• 插入基因/序列的物种来源： 人工合成(Synthetic)
• 插入基因/序列的片段大小（bp）： 6000
• 融合蛋白/标签：
  • 3XFLAG (插入基因-N端)

插入基因克隆信息

• 启动子： Cbh
• 克隆方法： 限制性内切酶法
• 5’端酶切位点： AgeI
• 5’端酶切位点克隆过程中是否被破坏： 未被破坏
• 3’端酶切位点： EcoRI
• 3’端酶切位点克隆过程中是否被破坏： 未被破坏
• 5’端测序引物： TTTATGGCGAGGCGGCGG
• 3’端测序引物： puro-variant-R (5-gtgggcttgtactcggtcat-3)

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